阴道外组织由正常的、人源性阴道上皮细胞和树突状细胞培养而成. 其高度分化的结构平行体内组织,是理想的毒性研究女性卫生, 阴道护理, 和杀微生物剂产品. 四种类型的外阴提供:

1) VEC-100(图1):包含上皮VEC细胞的上皮组织,

2) VLC-100(图1):包含上皮VEC和具有免疫能力的树突状细胞的上皮组织,

3) VEC-100- ft(图2):VEC-100全层版本,包括VEC上皮细胞和含有成纤维细胞的固有层, 和

4) VLC-100-FT(图2):包含树突细胞的ec -100- ft的免疫活性版本.

Epi阴道组织学新

图1:H&E染色组织切片(福尔马林固定)A)含正常人VEC细胞的VEC-100体外重建上皮组织模型, B)阴道外植组织. 在体外和体内组织中,都有有核的基底和上基底细胞层,然后是细胞核丢失和细胞充满糖原的层.

Epi阴道FT组织学新

 

图2:H&全层阴道外组织的组织切片(福尔马林固定)染色. VEC-100- ft组织由培养在固有层(LP)状胶原基质上的VEC上皮细胞组成,该基质含有成纤维细胞. 在上皮层中,VLC-100-FT由VEC上皮细胞和树突状细胞组成,在LP中包含成纤维细胞和树突状细胞.

 

图3

图3:经细胞角蛋白免疫染色的veca -100组织的福尔马林固定横切面, CK13, CK14, & CK18. Basal cells are stained by CK14 和 supra-basal cells by CK13; no cells are stained by CK18.

图4:暴露于含普通杀精剂制剂18小时后,阴道外全层(VEC-100-FT)组织模型的活力(A)和细胞因子释放(B), nonoxynol-9 (N9): a) PBS对照, b) KY果冻(KY), c) KY, 2% N9, 和d) 0.1% N9在PBS (0.1% N9). 注:随着组织活力的降低,IL-1β释放增加.

公布

图5:局部暴露(24小时)至60后VLC-100组织的HIV-1感染,000 CPM的HIV-1 ADA或NL4-3病毒. 暴露后,将组织洗3X次,然后再培养24小时. 然后提取细胞DNA,使用HIV-1 gag特异性引物对检测HIV-1转录物.

图6

图6:RT PCR显示:A)器官型阴道-外宫颈(VEC)组织模型和B)人宫颈组织外植体的toll样受体(TLR)表达.

杀微生物剂测试,性病感染研究,女性卫生,炎症,药物输送

阴道外注射为女性产品安全测试和研究HIV-1和其他性传播疾病提供了一种体外研究工具. 其组织结构和细胞生理学与体内阴道上皮组织密切平行, 使其成为毒物学和功效测试的理想材料, 也是生物研究的工具. 浏览我们的 参考图书馆 来看看研究人员是如何在这些领域中使用我们的阴道外组织的.

组织

包: 外阴试剂盒vec100包含24个组织, veci -112包含12个组织,veci -606包含6个组织. (组织“包”包含组织, 少量培养基, 和 plasticware; contact e世博官方网站 for specific kit contents.)

基质: 使用单孔组织培养板插入.

vec - 100: Nunc™单孔组织培养板插入物. 孔径= 0.4µm,内径= 0.80厘米,表面积= 0.5 cm2.

vec - 606: 聚碳酸酯单孔组织培养板插入,Nunc™. 孔径= 0.4µm,内径= 2.5厘米,表面积= 4.2 cm2.

文化: 在气液界面.

组织学: vec100: 10-16层非角化组织细胞层.

很多数字: 每个技术人员每周生产的组织批号都有一个特定的批号. 通常情况下,任何一周的组织产量都有多个批号. 在批号的末尾附加一个字母,以区分给定数量组织中的单个试剂盒. 所有的组织包在很多是相同的细胞, Medium, 处理, 培养条件, 等.

装运: 4°C,培养基中添加琼脂糖凝胶.

装运: 周一.

交付: 周二上午,通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二-周四,视地点而定.

保质期: 包括运输时间,组织在使用前可在4°C保存4天. 但是,除非绝对必要,否则不建议延长储存时间. 除了, 如果组织在同一天一致使用,可获得最佳的重现性, e.g. 周三早上,在4°C存放一夜之后.

长度的实验: 可继续培养至少1周,正常形态保持良好. 培养物必须每隔一天用5.0ml维护介质(ec -100- mm). 细胞培养插入物放置在6孔板上的培养架(部件号MEL-STND)或垫圈(部件号EPI-WSHR)上,以允许使用5.0 ml.

替代组织:

ec -100- ft:类似于ec -100,除了组织生长在胶原/阴道成纤维细胞基质(固有层).

VEC-112-FT:除12个组织外,与VEC-100-FT相似.

VLC-100:与VEC-100相似,只是组织中含有朗格汉斯细胞.

VLC-112:除12个组织外,与VLC-100相似.

VLC-100- ft:类似于VLC-100,除了组织生长在胶原/阴道成纤维细胞基质(固有层).

VLC-112-FT:除12个组织外,与VLC-100-FT相似.

细胞

类型: 正常的人外宫颈细胞(NHEC)分化为非角化的组织, 阴道-子宫颈外显型(部分编号vec100).

基因组成: 单一捐赠者.

来自: 成人外宫颈组织.

筛选: 艾滋病毒,乙型肝炎,丙型肝炎,支原体,细菌,酵母,真菌.

Medium

基础培养基: 杜尔贝科的改良鹰中型(DMEM)和F12中型.

生长因子/激素: 表皮生长因子及其他专有因子.

血清: 没有一个.

抗生素: 庆大霉素5µg/ml(庆大霉素正常水平的10%).

抗真菌剂: 两性霉素B 0.25µg / ml.

酸碱指示剂: 酚红.

其他添加剂: 专有的.

选择: 无酚红,无抗生素,抗真菌的培养基和组织是可用的. 代理在发货前3天被移除.

维护中: vec - 100毫米

质量控制和无菌

目视检查: 所有组织都要进行肉眼检查,如果发现有物理缺陷, 组织被拒绝装运.

最终用途测试: 每个批次的组织活力由MTT法测定. 组织暴露于1.0% Triton X-100持续30 60 120分钟. 采用MTT法测定降低组织活力(ET-50)所需的暴露时间. 将存活率降低到50% (ET-50)所需要的暴露时间必须为0.92 – 1.67小时. 在客户要求时,我们将提供一份质量控制测试结果的摘要以供参考. (对于TEER测量,e世博官方网站已经成功地使用了WPI Endohm系统.)

不育: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周,并检查无菌. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也要培养一周,并检查任何污染的迹象.

筛查病原体: 所有的细胞都经过PCR检测,HIV、乙肝和丙肝均呈阴性. 然而,没有一种已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2级别(生物安全级别2)或更高级别处理, “微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助,请联系您的现场安全主任或e世博官方网站技术服务.

地段失败的通知: 如果一个组织批次没有通过我们的质量控制或无菌测试, 我们会通知客户,并在适当的时候免费更换纸巾. 因为我们的一些QC和无菌测试是在出货后进行的, 我们会尽快通知你. (一般情况下,ET-50故障会在周四5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment.)

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